治白癜风哪里最好 http://www.znlvye.com/我们分享了研究细胞迁移的体外方法——划痕实验,与此同时细胞侵袭也是与转移密不可分的。那么今天要分享的是最常用的细胞侵袭方法:Transwell侵袭实验。与细胞划痕实验相比,Transwell相对过程复杂一些,下面就一起看看肿瘤细胞Transwell侵袭实验吧!
细胞侵袭实验示意图
肿瘤细胞转移的过程
Trans可译为转移,穿过,而well则为小室的意思。外形如同一个小杯子(如下图),杯底有通透性的膜(孔径0.1-12.0m,细胞侵袭一般用8.0、12.0μm)。
实验做完后就是最重要的结果统计了!
检测穿过的细胞数一般有两种方法:
1.直接计数法
①“贴壁”细胞计数
这里所谓的“贴壁”是指细胞穿过膜后,可以附着在膜的下室侧而不会掉到下室里面去。可以通过给细胞染色(如结晶紫染色、台盼蓝染色、Giemsa染色、苏木精染色、伊红染色),在镜下计数细胞。
②“非贴壁”细胞计数
由于某些细胞自身的原因或某些膜的关系,有时细胞在穿过膜后不能附着在膜上,而是掉进下室。这种情况下可以收集下层培养液,用流式细胞仪计数细胞量,也可用细胞计数的方法直接在镜下计数。
(小tips:NC即Negativecontrol,表示阴性对照,siRNA上期刚说过,大家还记得吗?
文章中大家可能还会遇到MOCK组,其实就是空白对照。所谓的空白对照有两种:一种是什么也不处理,类似阴性对照组;一种是只加转染试剂,不加转染的质粒或者siRNA,类似假手术组)
附:一款全新的全自动细胞计数器
全自动细胞计数器
用于细胞实验中质控和评判细胞状态。适用于计数浓度为1*-3*/ml,直径5-um大小的所有哺乳动物细胞、昆虫细胞,淋巴细胞、肿瘤细胞及部分浮游生物等不同种类的实验样本。比如用于总细胞浓度和活率测量。
特点:
(1)专利定焦计数,无需调焦,减少人为调焦造成实验误差
(2)一次可以检测5个样品,操作简单快捷
(3)测量结果稳定准确,误差<5%
简介:
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