我们在显微镜下观察组织和细胞的时，通常要把组织和细胞做成切片或是涂片，这时组织和细胞的厚度一般在1～10微米，在这个厚度的条件下，组织和细胞具有较好的透光性，基本上就没有颜色。
没有颜色非常不利于对组织和细胞的观察，因此，人们发明了多种给组织和细胞上色的方法，称为染色(stain)。其中苏木精-伊红染色(HE染色)是最常用的染色之一。
在HE染色过程中总会出现各种各样的问题，该如何解决呢？
一、切片染色不匀
（1）取材时组织太厚，固定过久，导致深部组织固定不佳，而表浅组织过度固定，而透明、脱水、浸蜡均是如此，这样在后期染色时就会出现染色不均匀。应该将厚的组织剖开固定。
（2）制片过程有问题，切片厚薄不一，或者有刀痕，或组织与玻片间存在气泡。同一张切片厚薄不一，一般都是在制片时，刀片固定不佳或刀片钝或刀片与组织角度不佳（一般最佳角度为5°）
（3）脱蜡前未烘烤，脱蜡时间过短或脱蜡液使用过久，导致脱蜡不彻底。
（4）染色液过少，着色不均匀；或染色时部分组织干涸而另一部分湿润，这样会导致组织吸附染料的能力不一。
（5）分化不当。
二、切片染色模糊不清
（1）固定剂对组织有一定媒染作用，它既可与蛋白结合又能与染料结合，可增强着色能力，同时能沉淀和凝固细胞内成分，使细胞内成分产生不同折光率造成光学差异。故固定不良是造成切片染色模糊不清的主要原因
（2）在日常病理制片中淋巴结处理不当造成切片染色后组织见发灰现象，其主要原因由于细胞密集，结构复杂导致固定液难以渗透到组织深部，从而造成组织中央固定不佳，而出现彻底发灰现象。可用等量无水乙醇乙醚混合液处理切片5-10分钟，乙醇洗，水洗，3%硫酸铁铵溶液补充媒染5分钟即可。
（3）送检标本部分用乙醇固定组织，常温下乙醇的白蛋白，球蛋白不再溶于水，而核蛋白则可溶于水。故乙醇固定标本切片，切片染色不良，细胞质染色较差。切片出现模糊不清现象，其补救办法液4%中性甲醛对标本再固定。
三、HE染色后镜下看到很多小黑点或小水珠似的物质
脱水过程不彻底，造成的水雾残留；中性树胶封片前，组织切片已经干涸，此时树胶不容易渗入组织间，容易残留细小的气泡。此时应该用二甲苯彻底脱去封片胶，并重新封片。
四、不管怎么操作，切片始终无法染色或淡染
这种情况一般因为组织固定时采用了酸性甲醛；或者组织在甲醛中浸泡时间太长；或者久置的甲醛变性分解为甲酸。补救：防患于未然，要么使用新鲜的中性甲醛固定，要么在存放的甲醛中加一点碳酸钠中和甲酸。对于已经固定的组织可考虑再次固定。对于已经制出的片子，染色前采用5%重铬酸钾溶液浸泡半小时以上，然后自来水漂洗5min，可改善染色。也可以将切片放入3%硫酸铁铵溶液中，补充染色媒介，增强苏木素与组织的亲和力（苏木素染色必须要媒介才能染上，单纯的苏木素与组织的亲和力很弱）。
HE染色是目前国内外病理诊断上广泛采用的常规染色方法。切片质量的好坏，可直接影响疾病诊断的及时与准确性。因此，能制作出一张高质量的HE染色切片，是优秀的实验者必须掌握的技术之一。
在染色过程中还有其他问题或者更好的解决方法，欢迎留言探讨。
