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统计分析
Masson三色染色是结缔组织染色中最经典的一种方法，又称马松染色，是显示组织中纤维的主要方法之一，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
Masson染色
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关，分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而，淡绿或苯胺蓝的分子量都很大，因此Masson染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
病理诊断意义
（1）器官硬化性疾病的观察：如肝硬变、心肌瘢痕的观察，胶原染色更易于观察诊断。
（2）瘢痕与淀粉样物质鉴别
（3）骨纤维异常增殖病与骨纤维化的鉴别
样本要求：组织片充分固定和脱蜡。
实验步骤
1.石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ10min-无水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。
2.苏木素染细胞核：masson染色试剂盒内Weigert氏铁苏木素染5min，自来水洗，1%的盐酸酒精分化数秒，自来水冲洗，流水冲洗数分钟返蓝。
3.丽春红染色：masson染色试剂盒内丽春红酸性品红液染5-10min，蒸馏水快速漂洗。
4.磷钼酸处理：masson染色试剂盒内磷钼酸水溶液处理约3-5min。
5.苯胺蓝染色：不用水洗，直接用masson染色试剂盒内苯胺蓝液复染5min。
6.分化：1%冰醋酸处理1min。
7.脱水封片：将切片依次放入95%酒精I5min-95%酒精II5min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-二甲苯Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min中脱水透明，将切片从二甲苯拿出来稍晾干，中性树胶封片。
8.显微镜镜检，图像采集分析。
Masson染色图
结果判读
◆胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色；
◆胞浆、肌肉、纤维素、红细胞呈红色；
◆胞核蓝黑色。
注意事项
1.苯胺蓝和丽春红要充分溶解然后过滤使用，不过滤的染液里面杂质过多，会阻碍染液和组织的结合紧密程度；
2.媒染后取出流水冲洗时间不宜过长，时间过长会导致染色效果整体偏淡；
3.丽春红染完后水洗速度要快，并且进入磷钼酸前尽量将水甩干；
4.1%的磷钼酸水溶液的作用一方面是使染上红色的胶原纤维被分化成无色或淡红色，而肌纤维、纤维素等仍呈鲜红色；另一方面对胶原纤维又起媒染作用，使胶原纤维与大分子染料的苯胺蓝液较易结合；
5.1%的磷钼酸水溶液要经常换，溶液明显变色了就需要更换了。
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