病理学技术篇 [复制链接]

病理学技术

小形有话说

HE染色篇

一、原理

苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining)，简称HE染色。HE染色是组织学、病理学教学与科研中最基础、使用最广泛的技术方法之一。

苏木精染液为碱性，可以将组织的嗜碱性结构（如核糖体、细胞核及细胞质中的核糖核酸等）染成蓝紫色；伊红为酸性染料，可以将组织的嗜酸性结构（如细胞内及细胞间的蛋白质，包括路易体、酒精小体以及细胞质的大部分）染成粉红色，使整个细胞组织的形态清晰可见。

二、实验标本

石蜡切片

三、实验试剂材料

酒精、二甲苯、苏木精水溶液、醇溶伊红染色液、蒸馏水、氨水等实验必备溶剂

四、实验步骤

（1）组织样本脱蜡：将待测组织样本切片放于二甲苯中，充分浸泡15~20min，浸泡完后更换二甲苯继续浸泡15~20min，目的是使用二甲苯将切片中的石蜡完全溶解，这样在进行染色的时候，染液可以充分进入组织中。

（2）组织样本水化：将浸泡过二甲苯的待测组织样本先放入无水乙醇中浸泡2min，使脱蜡时用的二甲苯可以被洗脱，且水可以进入组织中；再依次置于95%、90%、80%、70%乙醇中各浸泡2min以达到充分水化的效果。

（3）组织切片苏木素染色、分化与反蓝：将水化后的组织样本的切片用流水清洗。将清洗过后的组织样本的切片放入苏木素染液中浸泡5~10min，染色完毕后用蒸馏水洗去多余的苏木素染液。然后再使用0.5%~1%的盐酸酒精进行10~20s的分化，去除细胞核和细胞浆中多余的染液。分化完成后，再用流水将组织切片冲洗干净。为了使苏木素反蓝，把组织切片放入反蓝液中，让细胞核染蓝色。反蓝结束后用清水进行清洗。

（4）组织切片伊红染色与脱水：向上一步驟的组织样本切片中加入伊红染液，并充分染色3min，染色完毕后，再将组织切片进行梯度脱水，分别使用浓度为70%、80%、90%、95%以及无水乙醇进行操作。

（5）组织样本切片风干封片：将脱水后的组织样本切片使用二甲苯浸泡２次，每次持续5min，然后将组织样本切片风干，并使用中性树胶封片

形态学工作坊出品

监制

刘鲁英

编辑

王璐琛

校审

苏梦菲